1.        抗**藥敏紙片分類和名稱

注：紙片直徑9.2 mm，30片/支，2-8℃保存，效期見包裝。

2.        接種液的配制和接種

接種液的配制中，菌液濃度的控制是重要的，過濃會導(dǎo)致吡咯類抑菌圈判定困難出現(xiàn)假陰性。

對于大多數(shù)菌株，菌液濃度調(diào)成0.5麥?zhǔn)蠞岫燃纯?；克?**應(yīng)再稀釋5倍；隱球菌屬調(diào)成1.0麥?zhǔn)蠞岫取?/span>

用無菌棉拭子沾取菌懸液，略擠壓，直接均勻涂布平板，*后沿平皿周邊繞兩圈，保證涂布均勻。然后，平皿放35℃開蓋倒扣干燥15分鐘，須待平板上的水分被瓊脂完全吸收后再貼紙片。紙片貼上后用鑷尖壓一下，使其貼平。建議9cm平皿一般貼直徑9.2cm的藥敏紙片4-5個。

3.        培養(yǎng)

在多數(shù)情況下，30-35℃培養(yǎng)18-24小時后馬上測量抑菌圈，時間過長會使抑菌圈變小而導(dǎo)致假耐藥。如果生長不好，抑菌圈不清(如：新型隱球菌)可適當(dāng)延長培養(yǎng)時間至抑菌圈清晰為止。

4.        判讀標(biāo)準(zhǔn)

注：

l  對于多烯類抗**藥(AMB和NYS)，測量生長清晰的抑菌圈，抑菌圈內(nèi)出現(xiàn)的菌落必須視為耐藥突變株。

l  對于吡咯類抗**藥(FLU、ITC、MIC、ECO、KET、CLO)，在抑菌圈內(nèi)可能會出現(xiàn)較小的部分被抑制的菌落。測量時以正常生長的菌落形成的抑菌圈為準(zhǔn)，其內(nèi)部的較小菌落不應(yīng)視為突變株。

l  對于5-氟胞嘧啶(FC)，測量生長清晰的抑菌圈，抑菌圈內(nèi)出現(xiàn)的菌落通常為耐藥突變株。

l  抗**藥敏平板必須使用NCCLS推薦的RPMI-1640平板。使用其它平板可能會使FC無抑菌圈或抑菌圈減小。其它抗**藥敏的抑菌圈也有不同程度的改變。