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技術(shù)文章

中性粒細(xì)胞分離液操作說明

各種動(dòng)物或人中性粒細(xì)胞分離液操作說明和使用保存中的注意事項(xiàng):

本品為帶有乳光或微乳光的**水溶液。主要成分是Ficoll 400與泛影酸葡甲胺。適用于從

血液及組織勻漿中(小牛血清或人血清懸起勻漿的細(xì)胞1X107/ml分離所需細(xì)胞,在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生

物中廣泛應(yīng)用。

其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞

帶電不同,所以用戶在定制分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動(dòng)物的種屬及被分離細(xì)胞的名稱。

使用方法

例:取新鮮抗凝血1ml,與本分離液1:1 混勻后,以200-400轉(zhuǎn)/分,離心(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子)15

分鐘,取上清液及所有的白顏色細(xì)胞層,棄去所有的紅細(xì)胞,然后將取得的上清液及所有的白顏

色細(xì)胞層混勻液小心加于2ml的細(xì)胞分離液之液面上,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心(半徑15cm水平

轉(zhuǎn)子)15分鐘,此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分三層。**層;為血漿或組織勻漿液層。**層;為

環(huán)狀乳白色細(xì)胞。第三層;為混濁分離液層(包含部分中性粒細(xì)胞)和中性粒細(xì)胞層。收集第三層中性粒細(xì)胞和混濁分離液層(包含部分中性粒細(xì)胞)放入含細(xì)胞洗滌液(LOT#2010X1118

4-5毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心10-30分鐘。,沉淀經(jīng)反復(fù)洗2次即得所

需細(xì)胞。(此方法效果較好,推薦使用)

注意事項(xiàng)

1. 啟封后應(yīng)置4℃保存避免微生物的污染。2. 細(xì)胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待

溶液溫度升至室溫時(shí),搖勻后使用。3. 整個(gè)分離過程中,溫度應(yīng)控制在18-28℃且在無菌環(huán)境

下,避免微生物的污染,否則會(huì)影響分離質(zhì)量。

應(yīng) 用

-從動(dòng)物血液及組織中分離所需細(xì)胞

特點(diǎn)

-密度變化率依照Ficoll 400,泛影酸和氫氧化鈉. -*佳分離溶液的密度為參照具體產(chǎn)品的標(biāo)簽

-生理學(xué)參數(shù)          -在低粘度時(shí)高密度     -無菌-即用型-溶液

產(chǎn)品規(guī)格

溶液                             

PH                         7.0-7.5

滲透壓             280-340mOsmol/kg

內(nèi)**                       <5EU/ml

無菌                          已檢測

保存期限                         2

貯藏                     +18-+25

注 意

TBD實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞分離培養(yǎng)基是敏光型的。這種培養(yǎng)基在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于

各品牌離心機(jī)的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以

調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時(shí)間,摸索*佳的分離條件(具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定)。組織,血液,細(xì)胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

貯 藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

 

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