透析袋說(shuō)明|介紹

透析袋說(shuō)明|介紹
透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，就叫做透析袋。
自Thomas Graham1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室*簡(jiǎn)便*常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過(guò)程中，除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。
  透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。
  透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4℃透析，升高溫度可加快透析速度。
透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等，但用的*多的還是用纖維素制成的透析膜，目前常用的是美國(guó)Union Carbide（聯(lián)合碳化物公司）生產(chǎn)的各種尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的*小分子量，縮寫(xiě)為MwCO）通常為1萬(wàn)左右。
商品透析袋制成管狀，其扁平寬度為10 mm～77mm不等。為防干裂，出廠時(shí)都用10％的甘油處理過(guò)，并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì)，它們對(duì)蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害，用前必須除去。可先用50％乙醇煮沸1小時(shí)，再依次用50％乙醇、0.01mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/LEDTA溶液洗滌，*后用蒸餾水沖洗即可使用。實(shí)驗(yàn)證明，50％乙醇處理對(duì)除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中，若長(zhǎng)時(shí)間不用，可加少量NaN2，以防長(zhǎng)菌。洗凈涼干的透析袋彎折時(shí)易裂口，用時(shí)必須仔細(xì)檢查，不漏時(shí)方可重復(fù)使用。
  新透析袋如不作如上的特殊處理，則可用沸水煮五至十分鐘，再用蒸餾水洗凈，即可使用。使用時(shí)，一端用橡皮筋或線繩扎緊，也可以使用特制的透析袋夾夾緊，由另一端灌滿水，用手指稍加壓，檢查不漏，方可裝入待透析液，通常要留三分之一至一半的空間，以防透析過(guò)程中，透析的小分子量較大時(shí)，袋外的水和緩沖液過(guò)量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過(guò)夜時(shí)，體積增加50％是正常的。為了加快透析速度，除多次更換透析液外，還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些，可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析，可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。
檢查透析效果的方法是：用1％ BaCl2檢查(NH4)2SO4，用1％ AgNO3檢查NaCl、KCl等。
  為了提高透析效率，還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設(shè)計(jì)與制作各種簡(jiǎn)易的透析裝置。
根據(jù)個(gè)人使用經(jīng)驗(yàn)，建議使用透析袋效果比較好，還有具體需要什么規(guī)格的要看你的目的蛋白量有多大，才能決定使用多大的截留分子量的透析袋，一般截留量越大價(jià)格也就會(huì)越高，還有就是透析袋寬度的選擇，要看你的實(shí)驗(yàn)一次需要透析多少量來(lái)決定。

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