人白介素1β（h IL-1β）elisa試劑盒簡介：
IL-1是一種單核因子。1972年Gery等發(fā)現(xiàn)人白細胞培養(yǎng)的上清中含有一種可溶性物質(zhì)，這種物質(zhì)可促進小鼠胸腺細胞對植物血凝素(PHA)的有絲分裂反應(yīng)。 起初命名為**細胞激活因子(lymphocyte-activating factor, LAF)或內(nèi)源性熱原質(zhì)(endogenous pyrogen)、 破骨細胞激活因子 (osteoclast activating factor)、 黑素瘤細胞生長抑制因子 (melanomagrowth inhibitory factor)等，1979年國際統(tǒng)一命名為IL-1。
1. IL-1的產(chǎn)生 IL-1可由多種細胞合成和分泌。
(1)單核細胞、巨噬細胞(如腹腔粘連細胞peritoneal cell,PC)、 樹突狀細胞等在攝取抗原抗體復(fù)合物后或在抗原提呈過程中可產(chǎn)生IL-1。在大多數(shù)刺激劑刺激外周血單個核細胞 (PBMC)條件下,IL-1β mRNA水平要高于IL-1α mRNA 20～25倍。
(2)小鼠巨噬細胞細胞系P388D1、J774、PU5-1.8、 WEHI-3以及人前單核細胞株U937等在脂多糖(LPS)刺激后都能分泌大量的IL-1。
(3)表皮細胞、NK細胞、B細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、腦膠質(zhì)星狀細胞、腎小球系膜細胞(mesangial cell)、滑膜襯里細胞(synovial lining cell)、平滑肌細胞、上皮細胞、胎盤細胞、白血病細胞、PMN等在某些條件下亦可產(chǎn)生IL-1。
許多因素可以直接影響單核-巨噬細胞IL-1的分泌:①細胞因子如巨噬細胞激活因子(MAF)、集落刺激因子(CSF)、IFN-α、IFN-γ對IL-1產(chǎn)生具有增強作用。②LPS、PPD、BCG和李斯特菌, 葡萄球菌、鏈球菌外**, 活病毒等也是IL-1產(chǎn)生的刺激劑。 在外周血中20pg/ml內(nèi)**刺激單核細胞即可產(chǎn)生IL-1，因此在一般培養(yǎng)條件下，由于微量內(nèi)**的污染可刺激單核細胞分泌IL-1。10ng/ml LPS可使單核細胞合成IL-1增加100倍。③蛋白激酶C(PKC)的激活劑乙酸肉豆蔻佛波醇(phorbol myristate acetate, PMA)以及鈣離子載體(calcium ionophore)如A23187均具有強烈的刺激作用。④皮質(zhì)類固醇和前列腺素則對IL-1的產(chǎn)生有抑制作用。
2. IL-1的分子結(jié)構(gòu)和基因 完整的人IL-1α和IL-1β基因組分別為10.5kb和7.8kb。人和小鼠IL-1基因定位于2號染色體，均含7個外顯子。IL-1前體(ProIL-1)為31kDa，通過蛋白水解酶裂解形成成熟的IL-1分子。IL-1在不同種屬中有較高同源性。在氨基酸水平上，IL-1α和IL-1β在不同種屬同源性分別為60％～70％和75％～78％；但在同一種屬中IL-1α與IL-1β同源性只有25％。人IL-1α(PI5.0)和IL-1β(PI7.0)分別由159和153個氨基酸殘基組成，分子量約17.5kDa, 同源性為28％。IL-1對糜蛋白酶敏感。 不同細胞所產(chǎn)生IL-1的等電點可有所差異。
本試劑盒采用雙抗體夾心法?？谷?/span>IL-1β單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的IL-1β會與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人IL-1β抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人IL-1β抗體與結(jié)合在單抗上的人IL-1β結(jié)合而形成**復(fù)合物，若反應(yīng)孔中有IL-1β，會有顯色反應(yīng)。在450 nm處測OD值，IL-1β濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中IL-1β濃度。
本試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液或組織勻漿上清液中IL-1β濃度，供科研使用。
試劑盒內(nèi)容物：
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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1a標準品
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2支（凍干）
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1b標準品稀釋液
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1瓶
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2a濃縮生物素化抗體
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1支
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2b生物素化抗體稀釋液
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1瓶
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3a濃縮酶結(jié)合物
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1支
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3b酶結(jié)合物稀釋液
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1瓶
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4濃縮洗滌液20×
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1瓶
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顯色液
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1瓶
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終止液
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1瓶
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抗體包被板條
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8*12
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封板膠紙
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3張
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說明書
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1份
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保存條件：
4℃保存，6個月有效。
注意事項：
1. 短期內(nèi)使用可將試劑盒保存在2-8℃，如長時間請于-20℃保存。
2. 濃縮生物素化抗體（2a），濃縮酶結(jié)合物（3a）裝量極少，運輸中可能會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或離心處理，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
4. 不建議重復(fù)使用標準品。
5. 充分混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤其重要，*好使用微量振蕩器，也可在反應(yīng)過程中手工混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔或三復(fù)孔。
7. 為了您的**和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。上海歐韋達儀器科技有限公司提供上等的分子生物學(xué)試劑和試劑盒、培養(yǎng)基和培養(yǎng)耗材、細胞因子和細胞分離液、抗體和elisa試劑盒及常用生物試劑等，大量現(xiàn)貨火爆促銷中，歡迎撥打021-61805606洽談選購！