總蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品簡介：
本試劑盒提供全套試劑，適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體軟組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時(shí)內(nèi)完成。本試劑盒含有的獨(dú)特變性劑能夠溶解細(xì)胞膜包括細(xì)胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、**共沉淀等蛋白研究。
產(chǎn)品組成：
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產(chǎn)品組成
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310003
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310004
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規(guī)格
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50 assays
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100 assays
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Buffer I
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25ml
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50ml
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蛋白酶抑制劑混合物
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100ul
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200ul
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使用方法：
A． 細(xì)胞總蛋白提取
1. 裂解液制備：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞
3. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個(gè)細(xì)胞中加入500ul冷的裂解液，混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到總蛋白。
B． 組織總蛋白提取
1. 裂解液制備：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本剪碎，加入裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿吸入另一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
4. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到總蛋白。
上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/span>
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。
2. 整個(gè)過程須保持樣品處于低溫狀態(tài)。
儲存條件：
-20℃保存。